Lycée Paul Éluard 15 Avenue Jean Moulin 93206 SAINT DENIS | PROCÉDURE | Réf : M5003 | ||
Procédure d’identification d’un coque Gram + catalase + | Dates | |||
Rédacteur : Richard Maëva | Vérificateur | Approbateur : | ||
Date : 2011_10_07 Signature : Maeva Richard | Date : Signature : | Date : Signature : | ||
1. Objet
Identification d’un coque Gram + catalase +
2. Protocole d’identification
2.1. Morphologie et caractères d’orientation
L’étude se fera à partir de colonies venant soit d’une gélose au sang (+ ANC), d’une gélose au chocolat, d’une gélose GTS, d’un milieu CPS ID ou éventuellement d’une gélose Chapman.
A la coloration de Gram (voir procédure M1001), les coques Gram + catalase + apparaissent en des coques de coloration violette de taille environ 1 µm et regroupés en grappes de raisins ou en tétrades.
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Le groupement est confirmé lors de l’État Frais (voir procédure M1002) ainsi que l'immobilité de ceux-ci.
Le test enzymatique de la catalase est alors réalisé :
si le résultat est négatif, se renvoyer à la procédure M5004 (Identification des coques Gram + catalase -),
si le résultat est positif, on fait une première orientation vers les genres Staphylococcus et Micrococcus.
Si on a des Staphylococcus, on fait le test du récepteur au fibrinogène et/ou de la protéine A et/ou des antigènes capsulaires. Si le résultat est positif on peut soupçonner l’espèce S.aureus.
2.2. Galerie d’identification
On ensemence la galerie d’identification suivante :
Une gélose nutritive (+ éventuellement des disques de O129, bacitracine, novobiocine),
Une gélose Viande Foie régénérée,
Une gélose CTA + glucose,
Un bouillon cœur-cervelle (pour la recherche de la coagulase (et éventuellement de la thermonucléase)),
Une gélose Chapman pour la lecture du caractère mannitol (complémentaire).
Une API STAPH ou ID 32 STAPH.
2.3. Lecture de la galerie d’identification
Résultats et conclusion :
Sensible à O129 et bacitracine
Aérobie strict
Genre Micrococcus
Oxydatif ou inerte
Résistant à O129 et bacitracine
Aéro-anaérobie facultatif
Genre Staphylococcus
Fermentatif
2.3.1 Identification complémentaire de Staphylococcus
Mannitol + en général
Thermonucléase +
Espèce Staphylococcus aureus
Coagulase +
Mannitol –
Thermonucléase –
Espèce non aureus
Coagulase –
Attention à S.saprophyticus qui est mannitol +
Dans le cas d’une espèce non aureus, réaliser une galerie d’identification de l’espèce : ID 32 STAPH ou API STAPH.
Bibliographie
American Society For Microbiology
Historique des modifications de ce texte :
DATE : | Modifications apportées |
2011_10_07 | Création du texte |
2011_10_20 | Première révision apportée |
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