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MAQ

 Lycée Paul Éluard

Avenue Jean Moulin

93206 SAINT DENIS

Procédure

RÉF : M5001

Identification d’un bacille Gram – oxydase +

Création : 26_12_2011

Version : 0.I
Modifié :

Rédacteur : Slama Sondes

Vérificateur :

Approbateur :

Date : 26_12_2011

Date : 

Date : 

1.   Objet

·         Identification d’un bacille Gram – oxydase +

2. Protocole d’identification

2.1 Morphologie et caractères d’orientation :

·         Examen microscopique : L’étude se fera sur des colonies prélevées sur gélose ordinaire. Les bactéries Gram - sont mises en évidence par la coloration de Gram (voir procédure M1001), elles apparaissent colorées en rose.

Genre

Vibrio

Aeromonas/Plesiomonas

Pseudomonas

Forme

Bacille, long, fin, incurvé ou droit

Bacille, long, fin et droit

Bacille long et fin

Taille

4-5 µm de long et 0,5 µm d’épaisseur

3-4 µm de long et 0,5-0,7 µm d’épaisseur

3-4 µm de long et 0,6 µm d’épaisseur

Mobilité

Mobile par ciliature polaire

Mobile par ciliature polaire

Mobile par ciliature polaire

Gram

Négatif

Négatif

Négatif

Coloration

Homogène ou pâle

Homogène ou bipolaire

Homogène, bipolaire ou tigré

Sporulation

Non sporulé

Non sporulé

Non sporulé

Capsule

Non capsulé

Non capsulé

Non capsulé

·         Faire un état-frais (voir procédure M1002) qui permet de confirmer la mobilité par ciliature polaire.

·         Réalisation du test enzymatique de l’oxydase (voir procédure M2001) :

Ø  Si le test est positif, nous pouvons nous orienter vers le genre : Vibrio, Aeromonas, Pleisiomonas et Pseudomonas.

Ø  Si le test est négatif, nous pouvons nous orienter vers le genre : Enterobacterie, Acinetobacter et Stenotrophomonas (se reporter a la procédure M5002 : identification d’un bacille gram - oxydase -)

 

2.3 Galerie d’identification :

·         On ensemence la galerie d’identification suivante :

o    Gélose ordinaire,

o    Une gélose Viande Foie régénérée,

o    Une gélose HL + glucose,

o    API 20 NE

o    King A et B

 

2.4 Lecture de la galerie :

·         Résultats :

Type respiratoire :

AS

AAF

 

Pseudomonas

Vibrio/Plesiomonas/Aeromonas

·         Caractères différentiels des genres Vibrio/Plesiomonas/Aeromonas :

Caractère

Orientation

Morphologie incurvée

Genre Vibrio

ADH-

Genre Vibrio

O129 résistant

Genre Aeromonas

·         Sérotypage pour les Vibrio cholera, deux sérovars responsables du cholera : O1 ET O139

·         Caractères d’identifications du genre Pseudomonas :

Milieu

King A

King B

 

Pigment bleu

Pigment jaune/vert fluorescent sous lumière UV

Espèce

P. aeruginosa

Autres espèces de Pseudomonas fluorescents

·         Sérogroupage pour P. aeruginosa

3. Bibliographie

·         http://membres.multimania.fr/microbio/systematique/id1.html

·         Cours de microbiologie

4. Historique des modifications de ce textes :

DATES

Modifications apportées

   

Création du texte

2011_12_26

2011_12_26

Création du texte