LOGO Lycée Paul Éluard 15 Avenue Jean Moulin 93206 SAINT DENIS | Procédure | Réf : 0001 page 2 / 2 | ||
Procédure de la coloration des BAAR par la méthode de Kinyoun | Dates Version : 0.1 | |||
Rédacteur : BÉNARD Irène | Vérificateur | Approbateur : | ||
Date : 2011-12-26 Signature : | Date : Signature : | Date : Signature : |
1. But
Cette coloration à pour but d'identifier des Bacilles Acido-Alcoolo Résistants (BAAR), c'est-à-dire les Mycobacteriaceae, dans des prélèvements pathologiques.
2. Principe
Cette coloration est basée sur la capacité des BAAR à garder une coloration après l'action de l'éthanol et de l'acide fort concentré. Une contre coloration permet la coloration des autres bactéries.
Il s'agit d'une méthode spécifique, non toxique mais la détection des BAAR est fastidieuse.
3. Technique
3.1. Coloration
Après réalisation du frottis du prélèvement, on le recouvre de fuchsine phéniquée de Kinyoun pendant 10 minutes sans le chauffé puis on le rince à l'eau.
3.2. Décoloration
Une fois rincer, on recouvre le frottis d'un mélange d'acide et d'alcool de Kinyoun pendant 3 minutes puis on rince de nouveau.
3.3. Recoloration
On recouvre ensuite le frottis avec du bleu de méthylène phéniqué pendant 1 à 2 minutes puis on le rince et on le sèche.
On peut ensuite l'observer au microscope optique à l'objectif 100.
3.4. Observation
Il faut observer la lame à l'objectif 100 pendant 15 minutes afin d'être sûr de la présence ou non de ces bactéries. Les bactéries non BAAR apparaitrons en bleu et les BAAR en rose.
4. Interprétation
Si la présence de BAAR est observée, il faut compté le nombre de BAAR par champs sur 10 champs et en faire la moyenne.
Si le résultat est négatif (absence de bactéries colorées en rose), il faut alors compté 100 champs et rendre comme résultat: « BAAR non détecté sur 100 champs ».
5. Identification
Elle ne repose que sur l'observation du frottis. En effet, si la présence de fins bacilles roses est observé on peut conclure à la présence de Mycobactérium dans le prélèvement
DATE : | Modifications apportées |
24/12/11 | Création du texte |
|
|
Lycée Paul Éluard SAINT-DENIS