1. Objet

Montrer si la bactérie utilise l’urée comme seul source d’azote.

2. Démarche

2.1. Matériels utilisés

• Milieu urée tryptophane :

-urée

-tryptophane

-rouge de phénol

-eau

• Tube à hémolyse

• Anse

• Étuve

2.2. Mode opératoire :

• Ensemencer le milieu urée tryptophane à partir d’un milieu solide (suspension laiteuse)

• Incuber à l’étuve à 37°C pendant 2 heures minimum

• Lecture direct de l’uréase

2.3 Explication

Le virage au rose du rouge de phénol montre une alcalinisation du milieu due à la libération d’ammoniac. Ce la signifie que l’urée a été hydrolysé par la bactérie.

Remarque : A partir du milieu urée on peut réaliser le test TDA et indole.

 

-------------------------------------------------------------------ANCIENNE PROCÉDURE------------------------------------------------------------------------

 

Lycée Paul Éluard Avenue Jean Moulin 93206 SAINT DENIS	PROCÉDURE			RÉF : M2007
	Uréase			Création date Version : 1.2 Modification : date
Rédacteur : DUFAUX Mélanie		Vérificateur :	Approbatrices :
Date : 2010-03-23 Visa		Date : Visa	Date : Visa

1. OBJET

Cette procédure est un élément important de différenciation des bactéries qui utilisent l'urée comme seule source d'azote, notamment chez les Enterobacteriaceae.

2. DÉMARCHE

• Matériel:

Tube à essai ou à hémolyse;

Étuve à 37°C;

Pipette Pasteur ou anse.

• Réactif:

Une solution d'urée.

• Milieu de culture:

Milieu urée-tryptophane

• Technique:

 

1. À partir d'une souche pure, faire une suspension grâce à une pipette pasteur pleine de bactéries dans le milieu urée-tryptophane.
2. Puis mettre la suspension dans l'étuve durant 24h maximum.

 

• Lecture:

 

Le milieu avant incubation est incolore.

S'il y a une coloration rouge: cela indique une alcanisation du milieu suite à l'hydrolyse de l'urée. Donc la bactérie ensemensée est Uréase +.	S'il y a une légère coloration orange ou incolore: cela indique qu'il n'y a pas d'alcanisation du milieu. Donc la bactérie ensemensée est   Uréase -.
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3. BIBLIOGRAPHIE

• http://py.guillaume1.free.fr/pierre-yves/site%20microbiologie/page%20les%20milieux%20de%20culture/Tests/urease.htm

• http://knol.google.com/k/salim-djelouat/la-fiche-technique-de-la-recherche-de-l/1yexqll01wr4o/58#1_(2D)_But

4. HISTORIQUE

(indiquer dans le tableau les modifications réalisées. Mettre les éléments avec le dernier en HAUT. Respectez le format de date : ANNEE_MOIS_JOUR)

DATES
2010_03_23	Création par : DUFAUX Mélanie

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