techmicrobio.eu
site destiné aux STL-Biotechnologies et aux BTS/DUT biologiques

Recherche

Text Size

Nous avons 34 invités et aucun membre en ligne

Classer


LOGO

Lycée Paul Éluard

15 Avenue Jean Moulin

93206 SAINT DENIS

Procédure

Réf : 0001

page 1 / 1

Uréase

Dates

Création : 26/11/2011

Version : 0.1

Modifié :

Rédacteur : Perrochon Emilie

Vérificateur

Approbateur :

Date : 26/11/2011

Signature : PERROCHON Émilie

Date :

Signature :

Date :

Signature :


1. Objet

Montrer si la bactérie utilise l’urée comme seul source d’azote.

2. Démarche

2.1. Matériels utilisés

  • Milieu urée tryptophane :

-urée

-tryptophane

-rouge de phénol

-eau

  • Tube à hémolyse

  • Anse

  • Étuve

2.2. Mode opératoire :

  • Ensemencer le milieu urée tryptophane à partir d’un milieu solide (suspension laiteuse)

  • Incuber à l’étuve à 37°C pendant 2 heures minimum

  • Lecture direct de l’uréase

2.3 Explication

Le virage au rose du rouge de phénol montre une alcalinisation du milieu due à la libération d’ammoniac. Ce la signifie que l’urée a été hydrolysé par la bactérie.

Remarque : A partir du milieu urée on peut réaliser le test TDA et indole.





Lycée Paul Éluard SAINT-DENIS

 

-------------------------------------------------------------------ANCIENNE PROCÉDURE------------------------------------------------------------------------

 

Lycée Paul Éluard
Avenue Jean Moulin
93206 SAINT DENIS

PROCÉDURE 

RÉF : M2007

Uréase

Création date
Version : 1.2
Modification : date

Rédacteur : DUFAUX Mélanie

Vérificateur :

Approbatrices :

Date : 2010-03-23 Visa

Date : Visa

Date : Visa

1. OBJET

Cette procédure est un élément important de différenciation des bactéries qui utilisent l'urée comme seule source d'azote, notamment chez les Enterobacteriaceae.

2. DÉMARCHE

  • Matériel:
Tube à essai ou à hémolyse;
Étuve à 37°C;
Pipette Pasteur ou anse.
  • Réactif:
Une solution d'urée.
  • Milieu de culture:
Milieu urée-tryptophane
  • Technique:

 

  1. À partir d'une souche pure, faire une suspension grâce à une pipette pasteur pleine de bactéries dans le milieu urée-tryptophane.
  2. Puis mettre la suspension dans l'étuve durant 24h maximum.

 

  • Lecture:

 

Le milieu avant incubation est incolore.

S'il y a une coloration rouge: cela indique une alcanisation du milieu suite à l'hydrolyse de l'urée. Donc la bactérie ensemensée est

Uréase +.

S'il y a une légère coloration orange ou incolore: cela indique qu'il n'y a pas d'alcanisation du milieu. Donc la bactérie ensemensée est  

Uréase -.

>

3. BIBLIOGRAPHIE

  • http://py.guillaume1.free.fr/pierre-yves/site%20microbiologie/page%20les%20milieux%20de%20culture/Tests/urease.htm
  • http://knol.google.com/k/salim-djelouat/la-fiche-technique-de-la-recherche-de-l/1yexqll01wr4o/58#1_(2D)_But

4. HISTORIQUE

(indiquer dans le tableau les modifications réalisées. Mettre les éléments avec le dernier en HAUT. Respectez le format de date : ANNEE_MOIS_JOUR)

DATES 
  
  
  
2010_03_23Création par : DUFAUX Mélanie